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一、樣品前處理

1、所用試劑

1.1 水：去離子水

1.2 Loading Buffer：鋰鹽系統(tǒng)，pH 2.2

1.3 41種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品

2、前處理設(shè)備

1）分析天平:精度為 0.0001g

2）移液槍及槍頭

3）一次性注射器及0.22μm濾膜

4）低范圍pH試紙

3、樣品制備

稱(chēng)取適量樣品，加水(1.1)或Loading Buffer(1.2)溶解定容至容量瓶。測(cè)定并調(diào)至其pH值于2.2后，用一次性注射器取適量體積的試液，并過(guò)0.22μm的濾膜。移液槍移取1mL試液轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶，上機(jī)待測(cè)。

針對(duì)其同一樣品的試樣溶液與雜質(zhì)的濃度差別，可進(jìn)行多倍數(shù)稀釋液或大體積進(jìn)樣量、原液等情況，進(jìn)行多次測(cè)試，得出準(zhǔn)確的雜質(zhì)占比含量。

二、分析方法描述（Biochrom 30+）

氨基酸分析儀分析方法參數(shù)：

1）色譜柱：Biochrom Li型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱，4.6x20cm

2）分離程序：

運(yùn)行時(shí)間：經(jīng)分析時(shí)間+再生時(shí)間 174 min

3）反應(yīng)單元溫度：135°C

4）檢測(cè)波長(zhǎng)：570nm、440nm同時(shí)檢測(cè)

三、樣品中氨基酸含量的計(jì)算

樣品測(cè)定液氨基酸的含量按式（1）計(jì)算:

Ci = Cs/As × Ai× F ··························（1）式中:

Ci ———樣品測(cè)定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Cs ———氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Ai ———試樣測(cè)定液氨基酸i的峰面積;

As ———氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積;

F ———樣品稀釋倍數(shù)。

附、氨基酸純品中所含的各非目標(biāo)氨基酸雜質(zhì)含量其分析圖譜及做樣結(jié)果：

圖1.  樣品01原液